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      光譜儀和分光光度計

      簡要描述:光譜儀和分光光度計是將成分復雜的光分解為光譜線的科學儀器

      • 產品型號:
      • 廠商性質:經銷商
      • 更新時間:2024-02-01
      • 訪  問  量:346

      產品概述

      品牌WPI價格區間面議
      產地類別進口應用領域醫療衛生,環保,食品,化工,綜合

      儀器概況

             光譜儀(spectrometer)和分光光度計(Spectrophotometer),是將成分復雜的光分解為光譜線的科學儀器。

             當光線通過某種物質的溶液時透過的光的強度減弱,因為有一部分光在溶液的表面反射或分散,一部分光 被組成此溶液的物質所吸收,只有一部分光可透過溶液。因此:

      入射光=反射光+分散光+吸收光+透過光。

      如果我們用蒸餡水(或組成此溶液的溶劑)作為“空白"去校正反射,分散等因素造成的入射光的損失,則 出現:

      入射光=吸收光十透過光。

              不同的光源都有其發射光譜,因此可采用不同的發光體作為儀器的光源。不同物質都有特定的吸收光譜,根據溶液的吸收光譜,可以鑒別溶液中所含的物質成分。

              鈣燈發射光譜:鴇燈光源所發出380?780nm波長的光譜光通過三棱鏡折射后,可得到由紅、橙、黃、綠、 藍、靛、紫組成的連續色譜,該色譜可作為可見光分光光度計的光源。

              氫燈(或笊燈)發射光譜:氫燈(或気燈)能發出185-400nm波長的光譜,可作為紫外光光度計的光源。

      常用的波長范圍包括:

      (1)     200?380nm的紫外光區;

      (2)     380~780nm的可見光區;

      (3)     2.5?25卩m (按波數計為4000/®米?400/厘米)的紅外光區。

             用于測量200?380nm的紫外光區物質吸光度的儀器為紫外分光光度計;

             用于測量380?780nm的可見光區物質吸光度的儀器為可見光分光光度計(或比色計):

             用于測量2.5?25〃 m (按波數計為4000/厘米?400/厘米)的紅外光區物質吸光度的儀器為紅外分光光度計 或原子吸收分光光度計。

      工作原理

             光譜儀和分光光度計釆用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源, 光線透過測試的樣品后,部分光線被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品 的濃度成正比。

             單色光輻射穿過被測物質溶液吋,被該物質吸收的量與該物質的濃度和液層的厚度(光路長度)成正比, 其關系如下式:

      A=-lg(I/Io)=-lgT=kLc

      式中:A為吸光度:Io為入射的單色光強度;1為透射的單色光強度:T為物質的透射率;k為摩爾吸收系數; L為被分析物質的光程,即比色皿的邊長;c為物質的濃度;

       

      儀器用途

      1.    核酸的定量

             核酸定量是紫外光譜儀和紫外分光光度計使用頻率最高的功能??梢远咳苡诰彌_液的寡核昔酸,單鏈、 雙鏈DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波長260nm。

              除了核酸濃度,光譜儀和分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度,如A260/A280的比值, 用于評估樣品的純度,因為蛋白的吸收峰是280nmo

             純凈的樣品,比值大于1.8 (DNA)或者2.0 (RNA)。如果比值低于1.8或者2.0,表示存在蛋白質或者酚類 物質的影響。A230表示樣品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,較純凈的核酸A260/A230的比 值大于2.0。A320檢測溶液的混濁度和其他干擾因子。純樣品,A320一般是0。

      2.    蛋白質的直接定量(UV法)

             這種方法是在280nm波長直接測試蛋白,光度計可以直接顯示出樣品的濃度,或者是選擇相應的換算方法, 將吸光值轉換為樣品濃度。蛋白質測定過程非常簡單,先測試空白液,然后直接測試蛋白質。由于緩沖液中存 在一些雜質,一般要消除320nm的“背景"信息。

      3.    比色法蚩白質定量

             蛋白質通常是多種蛋白質的混合物,比色法測定的基礎是蛋白質構成成分:氨基酸(如酪氨酸,絲氨酸) 與外加的顯色基團或者染料反應,產生有色物質。有色物質的濃度與蛋白質反映的氨基酸數目直接相關,從而 反映蛋白質濃度。比色方法一般有BCA、Bradford、Lowry等兒種方法。

      4.    細菌細胞密度(OD 600)

             實驗室確定細菌生長密度和生長期,多根據經驗和目測推斷細菌的生長密度。在遇到要求較高的實驗,需要 釆用分光光度計準確測定細菌細胞密度。OD600是追蹤液體培養物中微生物生長的標準方法。以未加菌液的培養 液作為空白液,之后定量培養后的含菌培養液。

      5.    海洋學研究中痕量物質濃度

             WPI公司設計長光程液態樣本流通池(LWCC)具有50、100、250和500不同的光程可以選擇。因此,不同 光程長度的LWCC配合適的光源和檢測器,常用于海洋學應用中營養物分析的流體注射分析系統(如硝酸鹽、 亞硝酸鹽、磷酸鹽和鐵離子檢測等)。海水和淡水中CDOM (有色溶解有機物含量)的檢測,因為海水中CDOM的 含量極低(0.007m-l)。

      6.    大氣環境中超低含量物質濃度

            大氣中的SO2、硝酸鹽、亞硝酸鹽、羥基、棕碳、黑碳、水溶性鐵、氣溶膠等含量很低,使用普通的分光光 度計很難檢測出來。將大氣中釆集的樣本液態化,再配合不同光程的LWCC進行檢測,可以將這些含量極低的 物質加以檢出。


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